主要用途

活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）红色荧光（TMRM）检测试剂是一种旨在通过四甲基罗丹明甲酯染料，选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色，一旦释放到细胞浆，其荧光性显著降低，来分析和观察线粒体膜通道孔活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞线粒体（动物、人体、昆虫等）膜通道孔活性（开放状态）的检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景

线粒体膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时，线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。线粒体膜电位的去极化（depolarization），导致膜通道孔的开放，显著改变线粒体的通透性，使之线粒体膨胀（swelling），内容物释放。其中钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放，而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。四甲基罗丹明甲酯（tetramethylrhodamine methyl ester；TMRM），为罗丹明衍生物阳离子染料，作为电势测定（potentiometric）荧光探针：*，具有亲脂性的； 第二，与线粒体内膜负电极结合而聚集；第三，容易进入细胞及其线粒体。四甲基罗丹明甲酯进入细胞后，被细胞内酯酶切离，产生四甲基罗丹明。四甲基罗丹明进入线粒体后，被线粒体俘获，呈现强烈荧光。一旦线粒体膜通道孔开放，四甲基罗丹明释放出来而在胞浆重新分布，其荧光性显著降低。线粒体内荧光的变化，表明膜通道孔的开放状态。
注意事项

1．本产品为20次（0.5毫升体系/次）操作
2．操作时，须戴手套
3．操作时，避免污染母液
4．染色前，所有试剂溶液，除染色液（Reagent B）外，需37℃预热
5．建议细胞染色完成后，即刻进行荧光检测分析 
6．孵育时，必须避免光照
7．本产品友好使用于双重染色或重叠染色
8．本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和各种培养孔板，须相应调整处理液
9．可以使用±10nm波长的滤波器
10．可以使用100微摩尔CaCl2处理的样品作为膜通道孔开放的阳性对照
11．如果膜通道孔为瞬时开放（transient），则荧光缓慢且自发降低
12．本公司提供膜通道孔抑制剂：0.2毫摩尔环胞素A（cyclosporine A）－12226，维护荧光完整
13．本公司提供系列线粒体分析试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定荧光清晰