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冰冻切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾)荧光染色试剂盒
点击次数:4916 更新时间:2017-01-18

冰冻切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂盒

产品说明书

 

主要用途

 

冰冻切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂是一种旨在通过使胆固醇荧光染料菲律宾(FILIPIN)特异性与游离胆固醇结合,形成复合体,并产生蓝色荧光现象,以此检测总胆固醇的而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片组织总胆固醇的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。

 

技术背景

 

胆固醇(cholesterol)是一类称之为固醇类(sterols)或聚类异戊二烯(polyisoprenoid)或三萜皂甙元(triterpene)的多环化合物(polycyclic compound)。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离(free form)和脂化结合(ester)两种形式广泛存在于所有动物组织中,主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾(FILIPIN)是一类由四种同分异构体的多烯抗生素(polyene antibiotics)或多马霉素(polyene macrolide)的总称。源自于S. FILIPINENSIS细菌的培养液中。其分子式为C35H58O11,分子量为654.8。首先胆固醇酯酶(cholesterol esterase)的水解下,酯化胆固醇(cholesterel ester)转化为游离胆固醇,然后使用菲律宾与所有游离胆固醇结合形成聚集体或复合物,产生荧光。

 

产品内容

 

清理液(Reagent A)

毫升

固着液(Reagent B)

毫升

水解液(Reagent C)

毫升

水解液(Reagent C)

毫升

染色液(Reagent E)

毫升

产品说明书

1份

 

保存方式

 

保存水解液(Reagent C)和染色液(Reagent E在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存4℃冰箱里有效保证6

 

用户自备

 

荧光显微镜:用于样品染色后观察分析

 

实验步骤

 

  • 样本固着处理

 

  • 取出待测的510微米厚的冰冻切片(注意:使用快速冷冻处理-snap frozen的冰冻切片,不宜使用包埋处理)  
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A在切片上,铺满整个样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤23二次
  • 小心加上xx微升固着液(Reagent B,铺满整个样品表面
  • 室温下孵育30分钟
  • 小心移去切片上的固着液(Reagent B
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤89二次

二、样本染色处理

  • 小心加上xx微升水解液(Reagent C在切片上,铺满整个切片样品表面
  • 室温下孵育1小时(注意:可以延长至4小时,避免干枯)
  • 小心移去切片上的水解液(Reagent C
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤45一次
  • 小心加上xx微升抗干扰液(Reagent D,铺满整个切片样品表面
  • 室温下孵育10分钟
  • 小心移去切片上的抗干扰液(Reagent D
  • 小心加上xx微升染色液(Reagent E,铺满整个切片样品表面
  • 室温下孵育30分钟,避免光照
  • 小心移去切片上的染色液(Reagent E
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A清洗样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤1314二次
  • 即刻放上盖玻片或封片
  • 在荧光显微镜下观察:激发波长:340nm;散发波长:430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

 

注意事项

 

  • 本产品为50次操作
  • 操作时,须戴手套
  • 操作时,避免污染母液
  • 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
  • 样品染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察 
  • 荧光容易受到光漂白(photobleach)
  • 本产品染色后,可用于电镜分析
  • 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

 

质量标准

 

  • 本产品经鉴定性能稳定
  • 本产品经鉴定荧光清晰

产品说明书

(中文版)

 

主要用途

 

冰冻切片总胆固醇(酯酶法)菲律宾(FILIPIN荧光染色试剂是一种旨在通过使胆固醇荧光染料菲律宾(FILIPIN)特异性与游离胆固醇结合,形成复合体,并产生蓝色荧光现象,以此检测总胆固醇的而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片组织总胆固醇的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。

 

技术背景

 

胆固醇(cholesterol)是一类称之为固醇类(sterols)或聚类异戊二烯(polyisoprenoid)或三萜皂甙元(triterpene)的多环化合物(polycyclic compound)。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离(free form)和脂化结合(ester)两种形式广泛存在于所有动物组织中,主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾(FILIPIN)是一类由四种同分异构体的多烯抗生素(polyene antibiotics)或多马霉素(polyene macrolide)的总称。源自于S. FILIPINENSIS细菌的培养液中。其分子式为C35H58O11,分子量为654.8。首先胆固醇酯酶(cholesterol esterase)的水解下,酯化胆固醇(cholesterel ester)转化为游离胆固醇,然后使用菲律宾与所有游离胆固醇结合形成聚集体或复合物,产生荧光。

 

产品内容

 

清理液(Reagent A)

毫升

固着液(Reagent B)

毫升

水解液(Reagent C)

毫升

水解液(Reagent C)

毫升

染色液(Reagent E)

毫升

产品说明书

1份

 

保存方式

 

保存水解液(Reagent C)和染色液(Reagent E在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存4℃冰箱里有效保证6

 

用户自备

 

荧光显微镜:用于样品染色后观察分析

 

实验步骤

 

  • 样本固着处理

 

  • 取出待测的510微米厚的冰冻切片(注意:使用快速冷冻处理-snap frozen的冰冻切片,不宜使用包埋处理)  
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A在切片上,铺满整个样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤23二次
  • 小心加上xx微升固着液(Reagent B,铺满整个样品表面
  • 室温下孵育30分钟
  • 小心移去切片上的固着液(Reagent B
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤89二次

二、样本染色处理

  • 小心加上xx微升水解液(Reagent C在切片上,铺满整个切片样品表面
  • 室温下孵育1小时(注意:可以延长至4小时,避免干枯)
  • 小心移去切片上的水解液(Reagent C
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤45一次
  • 小心加上xx微升抗干扰液(Reagent D,铺满整个切片样品表面
  • 室温下孵育10分钟
  • 小心移去切片上的抗干扰液(Reagent D
  • 小心加上xx微升染色液(Reagent E,铺满整个切片样品表面
  • 室温下孵育30分钟,避免光照
  • 小心移去切片上的染色液(Reagent E
  • 小心加上xx微升清理液(Reagent A清洗样品表面
  • 小心移去切片上的清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤1314二次
  • 即刻放上盖玻片或封片
  • 在荧光显微镜下观察:激发波长:340nm;散发波长:430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

 

注意事项

 

  • 本产品为50次操作
  • 操作时,须戴手套
  • 操作时,避免污染母液
  • 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
  • 样品染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察 
  • 荧光容易受到光漂白(photobleach)
  • 本产品染色后,可用于电镜分析
  • 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

 

质量标准

 

  • 本产品经鉴定性能稳定
  • 本产品经鉴定荧光清晰
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