冰冻切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒 产品说明书 主要用途 冰冻切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂是一种旨在通过使用胆固醇酯酶和荧光染料菲律宾（FILIPIN）特异性与游离胆固醇结合，形成复合体，并产生蓝色荧光现象，以此检测总胆固醇的而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片组织总胆固醇的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。 技术背景 胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾（FILIPIN）是一类由四种同分异构体的多烯抗生素（polyene antibiotics）或多马霉素（polyene macrolide）的总称。源自于S. FILIPINENSIS细菌的培养液中。其分子式为C35H58O11，分子量为654.8。首先在胆固醇酯酶（cholesterol esterase）的水解下，酯化胆固醇（cholesterel ester）转化为游离胆固醇，然后使用菲律宾与所有游离胆固醇结合形成聚集体或复合物，产生荧光。 产品内容 清理液（Reagent A） | 毫升 | 固着液（Reagent B） | 毫升 | 水解液（Reagent C） | 毫升 | 水解液（Reagent C） | 毫升 | 染色液（Reagent E） | 毫升 | 产品说明书 | 1份 |
保存方式 保存水解液（Reagent C）和染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月 用户自备 荧光显微镜：用于样品染色后观察分析 实验步骤 - 取出待测的5至10微米厚的冰冻切片（注意：使用快速冷冻处理－snap frozen的冰冻切片，不宜使用包埋处理）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤2至3二次
- 小心加上xx微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面
- 室温下孵育30分钟
- 小心移去切片上的固着液（Reagent B）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤8至9二次
二、样本染色处理 - 小心加上xx微升水解液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面
- 室温下孵育1小时（注意：可以延长至4小时，避免干枯）
- 小心移去切片上的水解液（Reagent C）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤4至5一次
- 小心加上xx微升抗干扰液（Reagent D），铺满整个切片样品表面
- 室温下孵育10分钟
- 小心移去切片上的抗干扰液（Reagent D）
- 小心加上xx微升染色液（Reagent E），铺满整个切片样品表面
- 室温下孵育30分钟，避免光照
- 小心移去切片上的染色液（Reagent E）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤13至14二次
- 即刻放上盖玻片或封片
- 在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光
注意事项 - 本产品为50次操作
- 操作时，须戴手套
- 操作时，避免污染母液
- 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
- 样品染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察
- 荧光容易受到光漂白（photobleach）
- 本产品染色后，可用于电镜分析
- 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品
质量标准 产品说明书 （中文版） 主要用途 冰冻切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂是一种旨在通过使用胆固醇酯酶和荧光染料菲律宾（FILIPIN）特异性与游离胆固醇结合，形成复合体，并产生蓝色荧光现象，以此检测总胆固醇的而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片组织总胆固醇的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。 技术背景 胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾（FILIPIN）是一类由四种同分异构体的多烯抗生素（polyene antibiotics）或多马霉素（polyene macrolide）的总称。源自于S. FILIPINENSIS细菌的培养液中。其分子式为C35H58O11，分子量为654.8。首先在胆固醇酯酶（cholesterol esterase）的水解下，酯化胆固醇（cholesterel ester）转化为游离胆固醇，然后使用菲律宾与所有游离胆固醇结合形成聚集体或复合物，产生荧光。 产品内容 清理液（Reagent A） | 毫升 | 固着液（Reagent B） | 毫升 | 水解液（Reagent C） | 毫升 | 水解液（Reagent C） | 毫升 | 染色液（Reagent E） | 毫升 | 产品说明书 | 1份 |
保存方式 保存水解液（Reagent C）和染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月 用户自备 荧光显微镜：用于样品染色后观察分析 实验步骤 - 取出待测的5至10微米厚的冰冻切片（注意：使用快速冷冻处理－snap frozen的冰冻切片，不宜使用包埋处理）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤2至3二次
- 小心加上xx微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面
- 室温下孵育30分钟
- 小心移去切片上的固着液（Reagent B）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤8至9二次
二、样本染色处理 - 小心加上xx微升水解液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面
- 室温下孵育1小时（注意：可以延长至4小时，避免干枯）
- 小心移去切片上的水解液（Reagent C）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤4至5一次
- 小心加上xx微升抗干扰液（Reagent D），铺满整个切片样品表面
- 室温下孵育10分钟
- 小心移去切片上的抗干扰液（Reagent D）
- 小心加上xx微升染色液（Reagent E），铺满整个切片样品表面
- 室温下孵育30分钟，避免光照
- 小心移去切片上的染色液（Reagent E）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤13至14二次
- 即刻放上盖玻片或封片
- 在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光
注意事项 - 本产品为50次操作
- 操作时，须戴手套
- 操作时，避免污染母液
- 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
- 样品染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察
- 荧光容易受到光漂白（photobleach）
- 本产品染色后，可用于电镜分析
- 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品
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