石蜡切片组织冯库萨染色试剂盒

产品说明书
主要用途
石蜡切片组织冯库萨（VON KOSSA）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法
和银还原技术，分析存档中的石蜡包埋的组织切片中钙沉积现象的而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心改良VON KOSSA 方法、成功实验证明的。主要适用于石蜡包
埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无
菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
技术背景
钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过嗜银染色，钙离子受到强光
还原，由金属银沉积取代，呈现黑色。
产品内容
去石蜡液（Reagent A） 毫升
补水液A（Reagent B） 毫升
补水液B（Reagent C） 毫升
补水液C（Reagent D） 毫升
补水液D（Reagent E） 毫升
清理液（Reagent F） 毫升
染色液（Reagent G） 毫升
平衡液（Reagent H） 毫升
产品说明书1 份
保存方式
保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent G），避免光照；有效保证6 月
用户自备
核固红复染试剂盒：用于常规染色后复染
小型染色缸：用于石蜡切片的去石蜡和染色操作
60 瓦灯：用于还原钙离子
光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析
实验步骤
一、去石蜡处理
1． 取出10 片待测的石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4
℃条件下，固定16 小时，此步很重要）
2． 放进80℃烘箱，孵育30 分钟
3． 室温下静置15 分钟
4． 按下表依次放进小染色缸里孵育
染色缸孵育时间
毫升去石蜡液（Reagent A） 15 分钟
毫升去石蜡液（Reagent A） 15 分钟
毫升去石蜡液（Reagent A） 15 分钟
毫升补水液A（Reagent B） 3 分钟
毫升补水液B（Reagent C） 3 分钟
毫升补水液C（Reagent D） 3 分钟
毫升补水液D（Reagent E） 3 分钟
5． 小心移去切片上的补水液D（Reagent E）
6． 小心加上xx 微升清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5 分钟
8． 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
二、样本染色处理
1. 小心加上xx 微升染色液（Reagent G），铺满整个切片样品表面
2. 室温下置于太阳光直射或60 瓦灯直射孵育60 分钟；或直至可见黑色
3. 小心移去切片上的染色液（Reagent G）
4. 室温下，小心将切片置入xx 毫升清理液（Reagent F）中孵育2 分钟
5. 轻轻移去切片上的清理液（Reagent F）
三、样本复染处理
1. 小心加上xx 微升平衡液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面
2. 室温下孵育5 分钟
3. 小心移去切片上的平衡液（Reagent H）
4. 室温下，小心将切片置入xx 毫升清理液（Reagent F）中孵育2 分钟
5. 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
6. （选择步骤）样本复染处理（核固红）
7. 放上盖玻片或封片
8. 即刻在一般光学显微镜下观察：钙沉积阳性细胞呈现黑色（如果复染：细胞质呈现粉红
色，细胞核呈现红色）
注意事项
1． 本产品为50 次操作
2． 操作时，须戴手套
3． 石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16 小时，否则造成样品支离破
碎
4． 所有操作在室温下进行
5． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴，呈湿润状态，
可见反光
6． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
7． 样品染色避免过度，肉眼可见黑色即可终止染色
8． 建议使用核固红复染试剂盒
9． 组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察
10．本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定显色清晰