通用型尿素氮(urea nitrogen)含量比色法定量检测试剂盒 产品说明书 主要用途 通用型尿素氮(urea nitrogen)含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过使用双乙酰一肟,在酸性条件下,释放出双乙酰,与尿素缩合反应,产生粉红色复合物,所呈现的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中尿素氮含量的而经典的技术方法。该技术经过精心改良Jaffe方法、成功实验证明的。其适用于各种人体、动物组织、血液、体液样品等尿素氮水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,建立自动化体系。 技术背景 尿素(urea),又称为脲(carbamide),是一种有机化合物,分子式是(NH2)2CO,分子量为60.07。尿素是机体蛋白质代谢的副产品(by-product),通常在肝脏产生,由N-乙酰谷氨酸调节。机体通过尿素循环去除氮源废物,由血液循环经过肾脏,由尿液排泄。同时尿素具有维持肾单位渗透压平衡的功能。通过测定尿素的含量,来反映氮(nitrogen)的含量。氮含量,尤其是血液尿素氮(blood urea nitrogen;BUN),是肾功能评价的重要指标之一。正常成人的血液尿素氮含量为7至21毫克/分升。肾炎(Nephritis)、急性肾功能衰竭或损伤、重度急性胰腺炎、充血性心衰(congestive heart failure)、胃肠道出血等造成的氮质血症(azotemia)或肾功能低下的BUN含量会超过50毫克/分升。肾有关病(nephorosis)、淀粉样变性(amyloidosis)、肢端肥大症 (acromegly)、肝炎、急性肝功能损伤、怀孕后期等则导致BUN水平降低。使用双乙酰一肟(diacetyl monoxime),在酸性条件下,释放出双乙酰,与尿素缩合反应(condesation),产生粉红色复合物,呈现吸收峰值的变化(520nm波长),来定量分析尿素氮的含量。 产品内容 反应液(Reagent A) 毫升 酸性液(Reagent B) 毫升 标准液(Reagent C) 微升 产品说明书 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里;反应液(Reagent A)避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月 用户自备 15毫升锥形离心管或玻璃管:用于样品操作的容器 煮沸装置:用于反应孵育 比色皿:用于比色的容器 分光光度仪:用于比色分析 实验步骤 一、测定准备 - 准备好待测样品,置于冰槽里
- 设定好分光光度仪:波长520nm,并置零
- 移取xx毫升反应液(Reagent A)到新的15毫升锥形离心管或玻璃管
- 加入20微升待测样品或标准液(Reagent C),混匀
- 加入xx毫升酸性液(Reagent B),混匀
- 放进沸水煮沸孵育8分钟或100干式恒温仪孵育10分钟
- 室温下冷却
- 转移到比色皿里
- 即刻放进分光光度仪检测(520nm波长),获得吸光读数
三、计算样品浓度 [(待测样品吸光读数 X样品稀释倍数) ÷标准样品吸光读数] X 17.85 毫摩尔/升=毫摩尔尿素氮/升 注意事项 - 本产品为50次操作,包括标准样品
- 本产品检测范围在0.5至150毫克/分升尿素氮
- 建议使用新鲜样品,在4℃冰箱可以保存1周;暂时不予检测,放进-20或-80℃保存6个月
- 操作时,须戴手套
- 试剂具有腐蚀性,尤其是酸性液(Reagent B),注意操作安全
- 系统操作过程中,标准样品测定只需1次
- 反应液(Reagent A)为浅黄色,注意避光
- 测定值由低到高变化
- 用户可以使用520nm至525nm波长范围的任一波长进行检测
- 比色测定后,比色皿须清洗*
- 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度;例如尿液样品可以使用生理盐水稀释10至20倍
- 尿素氮换算:
1毫克/分升尿素氮X 2.14 =尿素毫克/分升 1毫克/分升尿素氮X 0.375 =尿素毫摩尔/升 | 男性 | 女性 | 血清或血浆 | 8.4—25.7毫克/分升(3.0—9.2毫摩尔尿素) | 8.4—20.1毫克/公斤(3.0—7.2毫摩尔尿素) |
- 建议用户建立自己的正常值范围
- 本公司提供系列生化学检测试剂产品
质量标准 |