主要用途

植物组织叶绿体DNA萃取试剂是一种旨在通过物理破壁和化学破膜及离心处理方法，从植物组织中分离出完整而纯化的叶绿体细胞器，然后进一步生物酶处理以获得高质量的叶绿体DNA的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于菠菜、豌豆、莴苣、卷心菜、甜菜、烟草等各种新鲜植物组织，包括叶片（leaf）、谷粒（grain）、种子（seed）等叶绿体核酸成分的分离。用于高等植物不育性、叶绿体遗传等研究。适合于后续的杂交、克隆、酶切、PCR分析等。产品即到即用，操作简易，性能稳定，无核酶污染，萃取纯度和产量皆高。 

技术背景

叶绿体（chloroplast）是绿色植物进行光合作用和能量转化的重要细胞器。叶绿体是细胞质中的一种色素体，因含叶绿素而成绿色。叶绿体由外被（envelope）、类囊体（thylakoid）和基质（stroma）组成。叶绿体DNA是一种闭合环状双股结构，含有10至30个基因，编码200个蛋白质。  

用户自备

15毫升锥形离心管：用于叶绿体初步制备物存放的容器
50毫升锥形离心管：用于植物组织收集、离心和清洗的容器
1.5毫升离心管：用于保存叶绿体
尼龙丝或60微米尼龙网：用于去除植物裂解残渣
小型漏斗：用于过滤的装置
4℃台式离心机：用于沉淀细胞和分离细胞器成分
微型台式离心机：用于沉淀核酸
DOUNCE匀浆器：用于裂解细胞
58℃恒温水槽：用于孵育反应物
涡旋震荡仪：用于混匀

注意事项

1．本产品为10次操作（1克植物组织） 
2．建议使用新鲜植物样品，暗室4℃冰箱里过夜
3．植物样品务必避光，以防止淀粉聚集
4．叶绿体操作均须在4℃或以下状态下进行
5．操作时，须无菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（Reagent B）和保存液（Reagent E）
6．建议使用足够的组织量
7．建议植物组织使用物理法组织匀浆器操作为；德国的BRAUN细胞匀浆器zui为理想
8．建议严格控制操作时间
9．通常匀化次数为80下（或组织块状消失为止）达到80％的组织细胞裂解为理想状态，但不同的组织类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的组织细胞裂解程度：完整组织细胞呈现发亮的圆环。低于50％可以增加匀化次数
10．通常孵育5分钟达到80％的组织细胞裂解为理想状态，但不同的组织类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的组织细胞裂解程度：完整组织细胞呈现发亮的圆环。低于50％可以增加孵育时间和涡旋震荡次数
11．试剂中的溶液使用前摇匀；酶解液（Reagent G）需放进37℃温育少许；为避免反复冻融，建议适量分装
12．通常1克植物组织中提取的叶绿体DNA达1至10微克
13．如果需要获得99％以上纯度的叶绿体DNA，建议使用高多糖/酚植物组织叶绿体DNA高纯分离试剂盒－16011.3.2
14．本公司提供系列植物叶绿体分析技术产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定无核酶污染
3．本产品经鉴定萃取产量和纯化程度高
4．本产品经鉴定无基因组DNA污染