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植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒产品说明书
点击次数:1003 更新时间:2017-08-21

主要用途

植物组织叶绿体DNA萃取试剂是一种旨在通过物理破壁和化学破膜及离心处理方法,从植物组织中分离出完整而纯化的叶绿体细胞器,然后进一步生物酶处理以获得高质量的叶绿体DNA的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于菠菜、豌豆、莴苣、卷心菜、甜菜、烟草等各种新鲜植物组织,包括叶片(leaf)、谷粒(grain)、种子(seed)等叶绿体核酸成分的分离。用于高等植物不育性、叶绿体遗传等研究。适合于后续的杂交、克隆、酶切、PCR分析等。产品即到即用,操作简易,性能稳定,无核酶污染,萃取纯度和产量皆高。 

技术背景

叶绿体(chloroplast)是绿色植物进行光合作用和能量转化的重要细胞器。叶绿体是细胞质中的一种色素体,因含叶绿素而成绿色。叶绿体由外被(envelope)、类囊体(thylakoid)和基质(stroma)组成。叶绿体DNA是一种闭合环状双股结构,含有10至30个基因,编码200个蛋白质。  

用户自备

15毫升锥形离心管:用于叶绿体初步制备物存放的容器
50毫升锥形离心管:用于植物组织收集、离心和清洗的容器
1.5毫升离心管:用于保存叶绿体
尼龙丝或60微米尼龙网:用于去除植物裂解残渣
小型漏斗:用于过滤的装置
4℃台式离心机:用于沉淀细胞和分离细胞器成分
微型台式离心机:用于沉淀核酸
DOUNCE匀浆器:用于裂解细胞
58℃恒温水槽:用于孵育反应物
涡旋震荡仪:用于混匀

注意事项

1.本产品为10次操作(1克植物组织) 
2.建议使用新鲜植物样品,暗室4℃冰箱里过夜
3.植物样品务必避光,以防止淀粉聚集
4.叶绿体操作均须在4℃或以下状态下进行
5.操作时,须无菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)和保存液(Reagent E)
6.建议使用足够的组织量
7.建议植物组织使用物理法组织匀浆器操作为;德国的BRAUN细胞匀浆器zui为理想
8.建议严格控制操作时间
9.通常匀化次数为80下(或组织块状消失为止)达到80%的组织细胞裂解为理想状态,但不同的组织类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的组织细胞裂解程度:完整组织细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加匀化次数
10.通常孵育5分钟达到80%的组织细胞裂解为理想状态,但不同的组织类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的组织细胞裂解程度:完整组织细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加孵育时间和涡旋震荡次数
11.试剂中的溶液使用前摇匀;酶解液(Reagent G)需放进37℃温育少许;为避免反复冻融,建议适量分装
12.通常1克植物组织中提取的叶绿体DNA达1至10微克
13.如果需要获得99%以上纯度的叶绿体DNA,建议使用高多糖/酚植物组织叶绿体DNA高纯分离试剂盒-16011.3.2
14.本公司提供系列植物叶绿体分析技术产品

质量标准

1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定无核酶污染
3.本产品经鉴定萃取产量和纯化程度高
4.本产品经鉴定无基因组DNA污染

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