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GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒
点击次数:1298 发布时间:2017-07-24

主要用途

 GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂是一种旨在使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,成为敏感探针的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种GST融合的重组蛋白。其应用于后续远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验和印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验等。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,反应敏感,重复性好。

技术背景

谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase;GST)融合蛋白(fusion protein)的技术,广泛应用于蛋白与蛋白之间相互作用的研究、抗体的制造和纯化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切离部位和已知激酶磷酸化部位构成,使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,作为敏感的探针,在远西方杂交(FAR WESTERN BLOT) 印迹实验或印迹覆膜结合(BLOT OVERLAY BINDING)实验中,探测和分析结合蛋白或多肽结构域。GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记是蛋白组学研究的常用工具。 
用户自备

[γ32P]ATP 同位素:用于同位素标记
1.5毫升离心管:用于样品反应操作和保存的容器
干式恒温仪:用于标记孵育
液体闪烁计数器(liquid scintillation counter):用于同位素活性测定
注意事项

1.本产品为20次操作
2.本产品的标记效率可达60%以上
3.操作时,须戴手套
4.操作时,严格无菌
5.同位素操作须严格遵守规章制度
6.建议使用带滤芯的枪头进行操作
7.同位素[γ32P]ATP(1居里=37GBq),建议使用ICN或AMERSHAM(安玛西亚)公司
8.由于[γ32P]同位素的半衰期短,建议使用新鲜同位素材料;且标记后即刻使用
9.可以直接在GST融合蛋白树脂上进行标记,然后常规洗脱或凝血酶(THROMBIN)切离纯化;纯化后进行同位素活性测定
10.本公司提供系列同位素处理试剂产品

质量标准

1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶

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