细胞中性脂质油红O染色试剂盒 产品说明书 主要用途 细胞中性脂质油红O染色试剂是一种旨在使用高度脂溶性偶氮染料油性红O染色技术，特异性地使细胞内中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白显示红色，以分析细胞样品中脂质状况的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物细胞样本。用于成脂细胞定性、细胞病理学分析（脂质细胞瘤；LIPOID）和识别（脂肪肉瘤；liposarcoma）等研究。产品即到即用，操作简捷，性能稳定，着色清晰。 技术背景 脂类物质（LIPIDS）是一类脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇类（STEROL）物质，例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量储存的作用，是膜结构的组成成分和细胞信号分子。油性红O（Oil Red O），又称为27号红色溶剂（Solvent Red 27）或苏丹红5B（Sudan Red 5B），是一种脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME AZO DYE）。其分子式为C26H24N4O，分子量为408.51。染色显示细胞脂类物质呈红色。 产品内容 清理液（Reagent A） 毫升 固着液（Reagent B） 毫升 脱水液（Reagent C） 毫升 染色液（Reagent D） 毫升 澄清液（Reagent E） 毫升 产品说明书 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D），避免光照；有效保证6月 用户自备 苏木素复染试剂盒：用于常规染色后复染 经典水相封片液：用于染色后封片处理 小型染色缸：用于细胞染色操作 温箱：用于试剂预热或保存 光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析 实验步骤 实验开始前，将染色液（Reagent D）置于60℃温箱里预热，避免光照。然后进行下列操作。 操作一：细胞载玻片染色 - 取出待测的细胞载玻片
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A）在载玻片上，铺满整个样品表面
- 小心移去载玻片上的清理液（Reagent A）
- 小心加上xx微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面
- 室温下，孵育10分钟
- 小心移去载玻片上的固着液（Reagent B）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
- 小心移去载玻片上的清理液（Reagent A）
- 重复实验步骤7至8一次
二、样本染色处理 - 小心加上xx微升脱水液（Reagent C）在载玻片上，铺满整个载玻片样品表面
- 室温下静置5分钟
- 小心移去载玻片上的脱水液（Reagent C）
- 重复实验步骤1至3一次
- 小心加上xx微升染色液（Reagent D），铺满整个载玻片样品表面
- 室温下静置7分钟；或直至可见红色
- 小心移去载玻片上的染色液（Reagent D）
- 室温下，小心将载玻片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分钟
- 轻轻移去载玻片上的清理液（Reagent A）
三、 样本复染处理 - 小心加上xx微升澄清液（Reagent E）在载玻片上，铺满整个载玻片样品表面
- 室温下孵育3分钟
- 小心移去载玻片上的澄清液（Reagent E）
- 室温下，小心将载玻片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分钟
- 小心移去载玻片上的清理液（Reagent A）
- （选择步骤）样本复染处理（苏木素）
- 放上盖玻片或水相封片
- 即刻在一般光学显微镜下观察
操作二：24孔细胞培养板染色 一、样本固着处理 1．小心抽去24孔细胞培养板里的培养液 2．每孔加入xx微升清理液（Reagent A），清洗生长中的细胞表面 3．小心抽去每孔里的清理液（Reagent A） 4．每孔加入xx微升固着液（Reagent B），覆盖整个生长表面 5．在室温下孵育10分钟 6．小心抽去固着液（Reagent B） 7．每孔加入xx微升清理液（Reagent A），清洗细胞表面 8．小心抽去清理液（Reagent A） 9．重复实验步骤7和8二次 二、样本染色处理 - 小心加上xx微升脱水液（Reagent C），覆盖整个生长表面
- 室温下静置5分钟
- 小心抽去脱水液（Reagent C）
- 重复实验步骤1至3一次
- 小心加上xx微升染色液（Reagent D），覆盖整个生长表面
- 室温下静置7分钟；或直至可见红色
- 小心抽去染色液（Reagent D）
- 室温下，小心加入xx微升清理液（Reagent A）
- 室温下孵育2分钟
- 小心抽去清理液（Reagent A）
三、 样本复染处理 - 小心加上xx微升平衡液（Reagent E），覆盖整个生长表面
- 室温下孵育5分钟
- 小心抽去平衡液（Reagent E）
- 小心加入xx微升清理液（Reagent A）
- 室温下孵育2分钟
- 小心抽去清理液（Reagent A）
- 样本复染处理（苏木素）
- 即刻在一般光学显微镜下观察
注意事项 - 本产品为20次（细胞载玻片）操作
- 操作时，须戴手套
- 所有操作在室温下进行
- 每次更换试剂溶液时，保持细胞表面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴，呈湿润状态，可见反光
- 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满细胞表面
- 样品染色避免过度，肉眼可见红色即可终止染色
- 建议使用苏木素复染试剂盒，增加染色对比度
- 细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察
- 封片处理，避免使用有机溶剂类包括乙醇等，而使用水相封片液；
- 本公司提供系列脂类染色试剂产品
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