链霉菌属细菌基因组DNA 纯化试剂盒

产品说明书
主要用途
链霉菌属细菌基因组DNA 纯化试剂是一种旨在通过化学和生物酶方法裂解、去蛋白、去
RNA 以及盐析沉淀来达到纯化革兰氏阳性细菌基因组DNA 的而经典的技术方法。该
技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种革兰氏阳性细菌DNA 样品
的制备，尤其适用于链霉菌种。产品即到即用，性能稳定，操作方便，提取效率和纯化程度
高。
技术背景
采用多种生物酶联合使用，使带有菌丝体和孢子的细菌更容易裂解，同时有效地使细菌中核
酶、PCR 反应抑制剂失活，其DNA 提取效率和纯度俱佳。
产品内容
缓冲液（Reagent A） 毫升
酶解液I（Reagent B） 毫升
裂解液A（Reagent C） 毫升
裂解液B（Reagent D） 毫升
酶解液II（Reagent E） 微升
酶解液III（Reagent F） 微升
萃取液（Reagent G） 毫升
浓缩液（Reagent H） 毫升
沉淀液（Reagent I） 毫升
清理液（Reagent J） 毫升
保存液（Reagent K） 毫升
说明书1 份
保存方式
保存酶解液I（Reagent B），酶解液II（Reagent E），酶解液III（Reagent F）和萃取液（Reagent
G）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6 月
用户自备
1.5 毫升离心管：用于样品操作的容器
37℃和65℃恒温水槽：用于样品孵育
微型台式离心机：用于沉淀细菌和核酸
涡旋震荡仪：用于混匀反应物
实验步骤
实验开始前，开启恒温水槽，并设置温度分别为℃和℃。然后开始下列操作：
1． 加入毫升新鲜菌液到毫升离心管
2． 放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（或RPM 例如eppendorf5415D）
3． 小心抽去上清液
4． 加入毫升缓冲液（Reagent A）
5． 涡旋震荡，充分混匀细菌颗粒群
6． 放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（或RPM 例如eppendorf5415D）
7． 小心抽去上清液
8． 加入微升缓冲液（Reagent A）
9． 加入微升酶解液I（Reagent B）
10．涡旋震荡，充分混匀细菌颗粒群
11．放进℃恒温水槽孵育小时
12．加入微升裂解液A（Reagent C）
13．加入微升裂解液B（Reagent D），充分混匀
14．放进℃恒温水槽孵育分钟
15．置入冰槽分钟
16．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（或RPM 例如eppendorf5415D）
17．小心移取上清液到新的毫升离心管
18．加入微升酶解液II（Reagent E），充分混匀
19．放进℃恒温水槽孵育分钟
20．加入微升酶解液III（Reagent F），充分混匀
21．放进℃恒温水槽孵育分钟，其间每间隔分钟，涡旋震荡秒
22．置于室温下冷却
23．加入微升萃取液（Reagent G）
24．涡旋震荡秒
25．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（或RPM 例如eppendorf5415D）
26．移出上层液相溶液到新的毫升离心管
27．加入微升浓缩液（Reagent H）
28．加入微升沉淀液（Reagent I）
29．上下倾倒混匀
29．放进℃微型台式离心机离心分钟，速度为g（或RPM 例如eppendorf5415D）
30．小心抽掉上清液
31．加入毫升清理液（Reagent J）
32．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（或RPM 例如eppendorf5415D）
33．小心抽去上清液
34．空气中晾干
35．加入微升保存液（Reagent K）
36．放进℃冰箱里过夜备用或即刻进行后续操作
注意事项
1． 本产品为20 次操作
2． 操作时，须戴手套
3． 本产品主要用于链霉菌属的基因组DNA 纯化
4． 本产品采用特殊酶解法，更为有效地提取基因组DNA
5． 建议使用足够的起始细菌量
6． 每毫升细菌可以获得3 至9 微克不等的基因组DNA
7． 本公司提供系列细菌技术产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定提取效率和纯化程度高