氨基糖类(amino sugar)总量摩根-艾尔森(MORGAN-ELSON)比色法定量 检测试剂盒产品说明书 主要用途 氨基糖类(amino sugar)总量摩根-艾尔森(MORGAN-ELSON)比色法定量检测试剂是一种旨在通过碱性加热处理后,产生显色素,与欧立希试剂反应,生成紫红色产物,即采用比色法测算氨基糖类总量的而经典的技术方法。该技术经过精心改良摩根-艾尔森(MORGAN-ELSON)方法、成功实验证明的。适用于各种细胞、组织裂解悬液和各种体液样品中氨基糖类总量的检测。产品即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。 技术背景 氨基糖类(amino sugar)是一类含有氨基替代羟基的糖,目前发现有60多种,例如氨基葡萄糖(glucosamine)、氨基半乳糖(galactosamine),以及衍生物乙酰基氨基葡萄糖(acetylglucosamine)、唾液酸(sialic acid),和抗菌化合物氨基糖苷(aminoglycoside)等。氨基糖类是地球上zui古老和zui丰富的有机化合物之一。其中氨基葡萄糖是糖基化蛋白生物合成的前体,甲壳纲动物(crustacean)体外骨骼和真菌细胞壁的结构成分。自然存在于动物骨组织、骨髓、真菌细胞壁和贝类动物壳上。作为食物补充剂,有助于关节的结构和功能,尤其是骨关节炎(osteoarthritis)患者。氨基半乳糖是糖蛋白类激素,例如卵泡刺激素(follicle stimulating hormone;FSH)、促黄体激素(luteinizing hormone;LH)的成分,具有肝毒性。在碱性条件下,通过加热处理,形成显色素(chromogen),进而与欧立希试剂(Ehrlich’s reagent),即酸性对二甲基氨基苯甲醛(N,N-dimethyl p-aminobenzaldehyde)反应,产生紫红色复合物,在分光光度仪(530nm 波长)下出现吸光峰值的变化,来定量测定样品中氨基糖类量的总含量。 产品内容 碱性液(Reagent A) 毫升 反应液(Reagent B) 毫升 标准液(Reagent C) 微升 产品说明书 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证3月 用户自备 1.5毫升离心管:用于标准样品配制和反应的容器 15毫升锥形离心管:用于样品反应操作的容器 沸水装置:用于反应孵育 比色皿:用于比色的容器 分光光度仪:用于比色分析 实验步骤 一、标准样品配制 - 准备好4个1.5毫升离心管,标记为1至5号管
- 分别加入xx微升碱性液(Reagent A)到每个离心管
- 移取xx微升标准液(Reagent C)到1号管,混匀
- 小心移取xx微升1号管稀释的标准液(Reagent C)到2号管,混匀
- 小心移取xx微升2号管稀释的标准液(Reagent C)到3号管,混匀
- 将1至4号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表
管号 | 标准液(Reagent C) | 碱性液(Reagent A) | 测定体系中 标准氨基葡萄糖含量 | 1 | xx微升 | xx微升 | xx微克 | 2 | xx微升1号管 | xx微升 | xx微克 | 3 | xx微升2号管 | xx微升 | xx微克 | 4 | —— | xx微升 | 0 |
- 设定好分光光度仪:波长530nm,并置零
- 分别移取xx毫升碱性液(Reagent A)到15毫升离心管
- 分别加入20微升上述制备的标准样品或待测样品,混匀
- 沸水煮沸1小时
- 分别加入xx毫升反应液(Reagent B),混匀
- 室温下冷却10分钟,避免光照
- 转移到新的比色皿
- 即刻放进分光光度仪检测(530nm波长):获得吸光读数
- 构建标准曲线:纵座标(Y轴)为吸光读数;横座标(X轴)为标准氨基葡萄糖含量(微克)
- 根据标准曲线获得样品对应氨基葡萄糖含量(微克)
- 计算样品实际氨基糖类浓度(微克/毫升)
注意事项 - 本产品为25次操作,包括标准液
- 本产品检测范围为5至20微克糖类总量
- 操作时,须戴手套
- 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
- 孵育时,避免光照
- 如果待测样品浓度过高或过低,可以稀释样品用量;注意在计算实际浓度时,不要忘记稀释倍数调整
- 糖类总量表述方式:微克氨基糖/毫升;微克氨基糖/细胞量;微克氨基糖/总蛋白量
- 本公司提供系列糖类检测试剂产品
质量标准 |