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胎牛血清配套人肺成纤维细胞说明书
点击次数:363 更新时间:2023-03-02

人肺成纤维细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各 一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管 等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。成纤维细胞 Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而 来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细 胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱 性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的 互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分 重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。 30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅 速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大, 细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状; 细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能 包括:构造和维持肺器官的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及 时大量聚集修复损伤组织。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。 1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱 和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。 2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。


细胞传代 1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次; 2) 添加0.25%消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培 养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待 细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化; 3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的 培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养; 4) 待细胞贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的培养基。


1培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。 

3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。 

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时 和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问 题得到解决。 

5. 该细胞只可用于科研。 

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考




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