分别通过气道内注入内毒素、单独香烟烟熏以及烟熏联合内毒素3种方法构建慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型,寻找经济、便捷、成功率高的COPD建模方法。方法:将雄性SD大鼠随机分为健康对照组、烟熏组、内毒素组和烟熏+内毒素组,每组10只。90 d后HE染色观察大鼠肺、支气管的病理改变。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清及肺组织匀浆中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、磷脂酶A2(PLA2)含量的变化。结果:烟熏+内毒素组大鼠肺、支气管的HE染色符合COPD的病理改变;其血清及肺组织中IL-8、TNF-α、PLA2含量较其他3组明显增多,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:烟熏加气管内注入内毒素法用于建立大鼠COPD模型优于单独烟熏法及单独气道内注入内毒素法。大鼠COPD模型熏烟法造模(大鼠吸烟模型)过程中常见问题与分析一慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary diseases, COPD)是一种具有气流受限特征的可以预防和治疗的疾病,气流受限不*可逆、呈进行性发展,与肺部对香烟烟雾等有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关。我国卫生部的数据显示:在中国人口死因中,呼吸疾病(主要是COPD)在城市占13.89%,居第4位;在农村占22.04%,居第3位。全中国每年因COPD死亡的人数达128万,相当于每分钟就有2.5人死于COPD。然而,但其确切病因和发病机理至今尚未*清楚,一直以来建立一种和人COPD的病理生理改变和临床特征相似的COPD动物模型,成为COPD科研工作者十分关注的焦点。 吸烟是COPDzui重要的致病因素,在众多的模型中,熏烟法被认为的COPD模型造模方法就,但同时也是难,zui不易实施的一种方法。只是因为,熏烟模型实施周期长、缺少标准化的程序和计量等等。笔者根据多年COPD熏烟模型的经验,与大家分享一些经验,希望能给各位的实验提供些许帮助。 动物类型:大鼠或小鼠都可以,没有统一的标准,在国内使用大鼠的模型比较多。 熏烟的方式:根据经费情况有口鼻式暴露系统和全身式暴露(即zui常见的熏烟箱)两种可选。口鼻式暴露系统采用塔式腔室结构,暴露仓内空气流动性好、烟气更均一、浓度更易调节等特点,但设备费用相对较昂贵;熏烟箱的通气性和气体质量较差,也不易进行精密参数的控制和监测,不过由于其结构较简单,操作容易操作,价格相对较低廉,甚至可以自制,所以是目前国内实验室zui常见的。 熏烟箱的容积和动物个数:由于口鼻式暴露系统采用精密的空气调节控制和*的塔式结构设计,每个结构都会有固定的使用动物数量的要求,一般不存在实验动物个数和仓室容积的问题。但熏烟箱由于本身气流效果较差,其箱式结构对动物没有明确的标明和要求,所以在实验设计时常常比较难于处理。在这里笔者总结出一个公式可供大家参考,即箱体容积(V)与动物数量(N)和动物大小(以质量为代表G)关系:V=G(单位为克)×N÷0.05。 熏烟时间:由于不同品系大小鼠对香烟烟气的敏感程度不同,总的熏烟时间也就不同,一般需要3~6个月的时间,其中每天熏烟时间不少于两次,每次zui少在30分钟以上,每次时间间隔不少于4个小时。其中对空气的质量要求:CO浓度大概1000ppm,O2浓度≥于18%,CO2浓度≤5%。 |