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浆蛋白提取服务

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产品特点:
浆蛋白提取服务浆蛋白就是在细胞中胞浆里所含的蛋白,在做实验和检查的时候可能会要将其提取出来。


 用一端包有橡皮的玻璃棒从冷却的50 mM Hepes, 150 mM NaCl, 3 mM MgCl2, measured pH 7.5, plus inhibitors 中收获细胞,用21号针使传代细胞破裂。 

胞浆蛋白提取方法
 通过离心( 1000 ×g for 3 min )收集细胞核,用1% SDS-lysis buffer溶解。 

胞浆蛋白提取方法
 所得上清液再离心(21,460 ×g for 1 h at 4 °C )得到的片状沉淀物为细胞膜/细胞骨架,上清中的蛋白为细胞质部分的。 

胞浆蛋白提取方法
 片状的细胞膜/细胞骨架沉淀用1% SDS-lysis buffer全部重悬。 

胞浆蛋白提取方法
 用TritonX-100-buffer (100 mM phosphate buffer, 150 mM NaCl, measured pH 8, 1.5% TritonX-100, 10% glycerol, plus inhibitors)处理细胞膜,将膜被分为可溶和不可溶两部分,通过离心(21,460 ×g for 60 min )取沉淀,用SDS-buffer将细胞骨架相连的膜重悬。 

胞浆蛋白提取方法
END
注意事项
正确规范的使用化学药剂和仪器。
本经验涉及专业步骤需要具备一定专业知识才能进行。

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