WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。上海创赛提：供WST-8水溶性四氮唑-8，193149-74-5，商品编号：CLS-42493-100mg，价格930元 CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。 CCK法的操作步骤 实验一：细胞活性检测 1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)，将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2)。 2、向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。 3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。 4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。 5、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。 实验二：细胞增殖-毒性检测 1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃，5% CO2)。 2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。 3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如：6、12、24或48小时)。 4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。 5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。 6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。 7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。 注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基)，去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。上海创赛提供供：65162-13-2，1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸甲酯盐[用于生化研究]，商品编号：C12-M1442-200MG，价格1974元 CANSPEC品质提供的性能，其优秀的品质满足您不同实验的多种需求，现货，生化试剂，原料药，医药中间体，科学仪器，实验室耗材，上海创赛,海量产品*中，欢迎电咨询! |
