材料和方法编辑
1.标本 人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。
2. 改良的油红O染色液 油红O 0. 5g, 50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至*溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。
3. 染色步骤 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片.
结果编辑
肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色。 图 肝脂肪变性:脂肪滴呈红色,细胞核蓝色。 改良
油红O染色法×400
讨论编辑
传统配制油红O染液 [1] ,所用的丙酮和异丙醇极易挥发,致使染液产生沉淀,染色时易在组织片上留下红色的结晶,而影响结果的判断。同时染液不易保存,每次染色时需要重新配制。我们经实验,采用50%乙醇作为溶解剂,减少了丙酮和异丙醇易挥发对人体的危害,染液不易产生沉淀;分化剂与油红O染液中的溶剂性质相似,这样利于切片上多余染液的分化,故组织切片上没有结晶产生。从而为病理诊断及鉴别诊断提供了可靠技术方法。组织常规用中性福尔马林固定,但用甲醛—钙液(40%甲醛10ml,蒸馏水90m1,氯化钙1g)固定效果更好,这样有利于保存磷脂。
封固显示脂肪的切片时,切片不宜太干,否则易产生气泡。发现有气泡,不能压盖玻片驱赶,因为这样会使脂滴移位。若有气泡可用温水浸掉盖玻片,而后再封固。
该方法操作简便,染色结果鲜艳,染液可反复使用。 [2] |
