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尼氏染色服务 实验耗材

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产品特点:
尼氏染色服务神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质,也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。各种神经细胞内都含有尼氏体,但其形状、数量、分

实验方法原理

尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏体,用来观察神经元内的细胞结构;还可以通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况

 

实验材料 神经元

试剂、试剂盒 焦油紫硫堇

实验步骤

(1)石蜡或冰冻切片依次经二甲苯、无水乙醇、95%酒精、80%酒精、70%酒精和蒸馏水,各自时间可以参考HE染色。

 

 

 

(2)1%焦油紫或1%硫堇染色10min至1h。

 

 

 

(3)蒸馏水清洗。

 

 

 

(4)70%酒精分色数秒至数分钟。

 

 

 

(5)依次经70%酒精、80%酒精、95%酒精,各2min脱水。

 

 

 

(6)无水乙醇2次,每次5min。二甲苯2次,每次10min。

 

 

 

(7)DPX封片。尼氏体呈紫色、细胞核呈淡紫色

 

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注意事项

(1)切片若为石蜡切片,要在二甲苯中先脱蜡。

 

 

(2)焦油紫或硫堇的染色时间也是根据染液配制时间的新旧、切片厚度和环境温度灵活掌握。

 

 

 

试剂准备:

 

 

 

(1)焦油紫溶液1g焦油紫溶于100ml蒸馏水,溶解后过滤待用。

 

 

 

(2)硫堇溶液1g硫堇溶于100ml蒸馏水,溶解后过滤待用。

 

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其他

(1)应该在显微镜下观察分色程度,使尼氏小体呈深色而背底基本无色为佳。如分色不够,可以退回酒精再次分色。如分色过度,也可退回再染。

 

 

(2)尼氏染色应充分脱水,否则容易褪色。

 

 

 

(3)HE染色方法虽然也能观察到胞质中嗜碱性颗粒,但结构不甚清晰,神经元的轴突、树突难以辨认。在尼氏染色中尼氏体清晰可辨,而且很容易区分轴突和树突。尼氏染色中尼氏体受染后呈块状(形如虎斑)或颗粒状,核周围尼氏体颗粒较大,近边缘处较小而细长,如在生理情况下,尼氏体大而数量多,反映神经细胞合成蛋白质的功能较强,在神经元受损时,尼氏体的数量可减少甚至消失,实验者可以根据实验目的选择HE染色和尼氏染色。

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