大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)购买细胞注意事项: 1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。 2.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 3.用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们 4.静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL维持细胞正常培养,待细胞汇合度 90%左右时正常传代。 5.请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6.建议客户收到细胞后前 3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。 细胞名称:大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化) 培养条件:RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 英文简称:PC-12(高分化) 种属:大鼠 1.取出细胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入37℃,5%CO2培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。 2.待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 3.细胞传代:吸出细胞瓶中的培养基,用 PBS清洗细胞一次。 4.加入0.125%胰蛋白酶消化液约 1mL至培养瓶中,37℃消化 3min左右;显微镜下 观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化。 5.用吸管轻轻吹打混匀,按 1:2或 1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的 *培养基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2细胞培养箱中培养。 6.待细胞*贴壁后,培养观察,每隔 2-3天更换新鲜的*培养基。 由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
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