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明胶法大鼠胚胎干细胞繁殖试剂盒产品说明书
主要用途
明胶法大鼠胚胎干细胞繁殖试剂是一种旨在通过特殊明胶替代滋养细胞作为培养表面的包被处理，提供细
胞的附着生长，促进细胞繁殖，同时体外维护大鼠胚胎干细胞的多能性，抑制培养中的胚胎干细胞的自发
分化的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于新的大鼠胚胎干细胞系
的建立、培养已有的胚胎干细胞系以及无基质细胞的CD34 干细胞等。产品即到即用，严格无菌、无病毒
和支原体，性能稳定，促细胞生长效应，重复性高，建立标准化体系。
技术背景
胚胎干细胞生长在基质表面，稳定繁殖效应明显。同时，在富含各种营养元素的培养基中，包括精制胎牛
血清，白血病抑制因子，非必需氨基酸、巯基乙醇以及预防污染的青霉素和链霉素等，维持胚胎干细胞活
性。产品符合美国USDA、FDA 和USP 的规定。
产品内容
包被液（Reagent A） 30 毫升
营养液（Reagent B） 100 毫升
产品说明书1 份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保证6 月
用户自备
25cm2 细胞培养瓶：用于干细胞培养的容器
微波炉：用于试剂加热
细胞培养箱：用于细胞孵育培养的设备
实验提示
1． 准备1 个25cm2 细胞培养瓶
2． 取出包被液（Reagent A），拧松瓶盖（不要打开）
3． 放进微波炉加热（注意：避免溢出）
4． 移取2 毫升包被液（Reagent A）到25cm2 细胞培养瓶，均匀铺平
5． 室温下，静置30 分钟
6． 使用无菌吸管，真空抽吸培养瓶里的包被液（Reagent A）
7． 加入1 毫升（5X 105 细胞）用户自备的大鼠胚胎干细胞
8． 加入4 毫升营养液（Reagent B），混匀铺平
9． 放进37℃二氧化碳细胞培养箱孵育24 小时
10．小心抽去细胞培养液
11．重复实验步骤8 至10 一次
12．传代前4小时使用2毫升营养液（Reagent B）换液一次，传代比例为1：1至1：10之间
注意事项
1． 本产品为10 次操作
2． 严格无菌操作
3． 操作时须戴手套
4． 使用时，避免污染母液
5． 用户根据需求，可以添加各种生长因子，例如成纤维细胞生长因子（Fibroblast growth factor；FGF）等
6． 建议每天换液；如果溶液颜色为桔红色，务必即刻换液，不要等到溶液颜色为黄色
7． 建议按下表用量使用
培养板/培养皿/培养瓶包被液（Reagent A） 营养液（Reagent B）
6 孔板1.5 毫升3 毫升
30mm 1.5 毫升2 毫升
60mm 3 毫升6 毫升
100mm 6 毫升12 毫升
25cm2 2 毫升4 毫升
75cm2 6 毫升15 毫升
8． 本公司提供系列细胞培养产品
质量标准
1． 产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定无噬菌体、支原体、病毒污染