罗丹明123简易细胞核外形态染色试剂盒

产品说明书

主要用途

罗丹明123简易细胞核外形态染色试剂是一种旨在通过荧光染料罗丹明123快速集聚在细胞核周围的活体线粒体，呈现黄绿色，用于分析和观察细胞核外围形态的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞核外或线粒体形态（动物、人体、植物、昆虫等）的观察。产品严格无菌，即到即用，荧光清晰，操作简捷，性能稳定。 

技术背景

线粒体是细胞中重要的细胞器，大量存在于代谢旺盛的细胞中，分布在细胞核周围。线粒体标记荧光探针罗丹明123（Rhodamine123），是一种膜电位敏感的阳离子荧光染料，可以自由进入细胞，高度选择性地聚集在线粒体。在活细胞状态下直接染色，借助480nm或500nm激发波长可以清晰看到被染成黄绿色的线状或颗粒小体的线粒体，分布在细胞核周围。

产品内容

染色液（Reagent A） 微升

产品说明书                1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保证6月

用户自备

磷酸缓冲液：用于清洗样品

微型台式离心机：用于悬浮细胞的操作

盖玻片：用于染色后封片

荧光显微镜：用于观察细胞核DNA染色

实验步骤

• 贴壁细胞染色

• 准备1个细胞培养48孔板的待测细胞，每孔铺满率达70％
• （注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项5）
• 小心抽去细胞培养液
• 轻轻沿着孔壁加入500微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液（PBS）到细胞培养孔，覆盖培养孔表面
• 小心抽去1毫升磷酸缓冲盐溶液（PBS）
• 小心加入100微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液（PBS），覆盖培养孔表面
• 小心加入xx微升染色液（Reagent A） 
• 轻轻摇动培养板，使其混匀
• 室温下孵育60分钟，避免光照（或37℃培养箱里孵育15分钟）
• 小心抽掉染色液
• 小心加入200微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液（PBS），覆盖培养孔表面
• 即刻在倒置荧光显微镜下进行观察：

• 悬浮细胞染色

• 将悬浮细胞（1 X 10⁶细胞）移入到1.5毫升离心管
• 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽掉上清液
• 加入500微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液（PBS），混匀细胞颗粒群
• 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽掉上清液
• 加入100微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液（PBS），混匀细胞颗粒群
• 加入xx微升染色液（Reagent A），混匀
• 室温下孵育60分钟，避免光照（或37℃培养箱里孵育15分钟）
• 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽掉上清液
• 加入100微升用户自备的磷酸缓冲盐溶液（PBS），混匀细胞颗粒群
• 移出5微升到载玻片上，放上盖玻片
• 即刻在荧光显微镜下进行观察： 
• 或即刻进行细胞流式仪分析：

注意事项

• 本产品为100次操作
• 本产品友好使用于双重染色或重叠染色
• 操作时须戴手套
• 操作时，避免污染母液
• 本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和各种培养孔板，须相应调整试剂溶液：

• 本产品可用于悬浮细胞或细胞脱离处理后染色
• 如果染色固定后的细胞，室温下孵育时间15分钟
• 孵育时，须避免光照
• 建议细胞染色完成后，即刻进行分析，不宜超过2小时
• 细胞流式仪分析前，须混匀内容物
• 细胞流式仪分析，细胞检测量不得少于10000个
• 本公司提供系列简易细胞核染色分析试剂产品

质量标准

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定荧光清晰