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冰冻切片脂质油红O染色试剂盒
点击次数:1986 更新时间:2017-01-18

冰冻切片脂质油红O染色试剂盒

产品说明书
主要用途
冰冻切片脂质油红O染色试剂是一种旨在使用高度脂溶性偶氮染料油性红O染色技术,特异性地使组织细胞内中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白显示红色,以分析冰冻切片组织样品中脂质状况的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物组织冰冻切片样本。用于成脂细胞定性、细胞病理学分析(脂质细胞瘤;LIPOID)和识别(脂肪肉瘤;liposarcoma)等研究。产品即到即用,操作简捷,性能稳定,着色清晰。
技术背景
脂类物质(LIPIDS)是一类脂溶性(疏水性)的自然分子,包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂,以及其它固醇类(STEROL)物质,例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量储存的作用,是膜结构的组成成分和细胞信号分子。油性红O(Oil Red O),又称为27号红色溶剂(Solvent Red 27)或苏丹红5B(Sudan Red 5B),是一种脂溶性偶氮染料(LYSOCHROME AZO DYE)。其分子式为C26H24N4O,分子量为408.51。染色显示组织细胞脂类物质呈红色。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
固着液(Reagent B) 毫升
脱水液(Reagent C) 毫升
染色液(Reagent D) 毫升
澄清液(Reagent E) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent D),避免光照;有效保证6月
用户自备
小型染色缸:用于细胞染色操作
温箱:用于试剂预热或保存
光学显微镜:用于组织细胞染色后观察分析
1
苏木素复染试剂盒 用于常规染色后复染
经典水相封片液 用于染色后封片处理
120
10
20
10
10
实验步骤
实验开始前,将染色液(Reagent D)置于60℃温箱里预热,避免光照。然后进行下列操作。
一、 样本固着处理
1. 取出待测的10微米厚冰冻组织切片(注意:使用快速冷冻snap-frozen制片,避免包埋处理)
2. 小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个样品表面
3. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
4. 小心加上200微升固着液(Reagent B),铺满整个样品表面
5. 室温下,孵育10分钟
6. 小心移去切片上的固着液(Reagent B)
7. 小心加上200微升清理液(Reagent A),清洗样品表面
8. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
9. 重复实验步骤7至8一次
二、样本染色处理
1. 小心加上200微升脱水液(Reagent C)在切片上,铺满整个切片样品表面
2. 室温下静置5分钟
3. 小心移去切片上的脱水液(Reagent C)
4. 重复实验步骤1至3一次
5. 小心加上200微升染色液(Reagent D),铺满整个切片样品表面
6. 室温下静置7分钟;或直至可见红色
7. 小心移去切片上的染色液(Reagent D)
8. 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟
9. 轻轻移去切片上的清理液(Reagent A)
三、 样本复染处理
1. 小心加上200微升澄清液(Reagent E)在切片上,铺满整个切片样品表面
2. 室温下孵育3分钟
3. 小心移去切片上的澄清液(Reagent E)
4. 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
6. (选择步骤)样本复染处理(苏木素)
7. 放上盖玻片或水相封片(注意:建议使用 )
8. 即刻在一般光学显微镜下观察:脂类物质呈现红色(如果复染则细胞核呈现篮色)
2
经典水相封片液
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 所有操作在室温下进行
4. 每次更换试剂溶液时,保持切片表面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴,呈湿润状态,可见反光
5. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面
6. 样品染色避免过度,肉眼可见红色即可终止染色
7. 建议使用
8. 组织染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
9. 样品染色后保存,避免光照
10.封片处理,避免使用有机溶剂类包括乙醇等,而使用水相封片液;建议使用经典水相封片
11.本公司提供系列脂类染色试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定显色清晰
3
苏木素复 增加染色对比度 染试剂盒

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